O câncer reúne todas as condições para se tornar a principal causa de mortes nas próximas décadas, sobretudo nos países pobres. O câncer gástrico é o tipo de neoplasia maligna mais frequente e um grande problema de saúde em todo o mundo. No Brasil o câncer de estômago é o quinto tipo de neoplasia maligna mais frequente e estimativas para o ano de 2013 apontam para o aparecimento de aproximadamente 20.000 casos deste tipo de câncer. A sua etiologia é multifatorial e diversos fatores como: fatores genéticos e epigenéticos, dieta, consumo de álcool e sal e, a infecção gástrica por O câncer reúne todas as condições para se tornar a principal causa de mortes nas próximas décadas, sobretudo nos países pobres. O câncer gástrico é o tipo de neoplasia maligna mais frequente e um grande problema de saúde em todo o mundo. No Brasil o câncer de estômago é o quinto tipo de neoplasia maligna mais frequente e estimativas para o ano de 2013 apontam para o aparecimento de aproximadamente 20.000 casos deste tipo de câncer. A sua etiologia é multifatorial e diversos fatores como: fatores genéticos e epigenéticos, dieta, consumo de álcool e sal e, a infecção gástrica por Helicobacter pylori estão associados a essa doença. Alterações epigenéticas tais como a metilação das regiões promotoras de genes envolvidos na homeostase celular podem contribuir para carcinogênese gástrica. No presente estudo foi avaliado o perfil de metilação dos genes CDH1, APAF1 e CASP9 em 44 amostras de origem gástrica, sendo 16 amostras de câncer gástrico do tipo difuso, 23 do tipo intestinal e 15 amostras de tecido gástrico normal, através da técnica de MSRE-PCR (Methylation-Sensitive Restriction Enzyme PCR). Foi avaliada ainda a associação entre o perfil de metilação dos genes com o estadiamento e gênero. Os resultados obtidos a partir da técnica de Methylation- Sensitive Restriction Enzyme PCR revelou a hipermetilação do gene CDH1 62% (n=24) e a hipometilação dos genes APAF1 3% (n=1) e CASP9 5% (n=2) das amostras de câncer gástrico, respectivamente. No entanto, não houve significância estatística entre o perfil de metilação destes genes, com as características histopatológicas e estadiamento das amostras de adenocacinomas gástricos e normais (p≥0,05).

As furocumarinas (FCs) são uma importante classe de compostos fotoativos que potencialmente podem se ligar ao DNA formando complexos intermoleculares, e uma vez excitados por luz UVA (~365 nm) são capazes de formar fotoadições, que podem resultar em mutagênese e letalidade. Alem disso, quando adicionadas ao meio de plaqueamento pós-irradiação, diminuem a sobrevivência, devido inibição de reparo de DNA. As FCs associadas à UVB (312 nm), permanecem pouco conhecidas. O objetivo do presente estudo foi investigar o efeito da luz UVB, e combinada com soluções de 8-metoxipsoraleína (8-MOP), 4,5’,8-trimetilpsoraleína (TMP) e 3-carbetoxipsoraleína (3-CPs) em diferentes concentrações, sobre o crescimento de Staphylococcus aureus. Avaliamos também o efeito destas FCs em meio de plaqueamento. O tratamento com 8-MOP-UVB e TMP-UVB foram mais eficazes em induzir letalidade do que o tratamento apenas com UVB. O aumento da concentração de 8-MOP resultou numa mortalidade mais elevada enquanto que o aumento na concentração de TMP levou a uma redução na mortalidade. Por outro lado, 3-CPs exibiu um efeito fotoprotetor contra danos causados por UVB em todas as concentrações testadas. Os resultados com FCs no meio de plaqueamento mostraram que a 8-MOP induziu o maior efeito letal e também aumentou a mortalidade da cepa bacteriana tratada por FC-UVB, sugere-se a inibição do reparo para explicar esse fenômeno. Os diferentes efeitos apresentados pelas FCs podem estar relacionados com diferenças na especificidade por seqüência de ligação e fotorreação, a inibição da formação de dímeros de pirimidina por moléculas intercaladas e eficácia de sistemas de reparo. Esses resultados reforçam a necessidade de mais estudos para elucidar a participação das FCs como agentes fotossensibilizantes e fotoprotetores em sistemas biológicos, quando combinadas com UVB.

As leguminosas estão entre as plantas mais conhecidas pelas pessoas de diversas partes do mundo. Nesta família, muitas são as plantas que usamos como alimento. O gênero Canavalia ao qual pertence o feijão da praia, dentro da família Leguminosae, é formado por um pequeno grupo de 48 espécies. O termo ‘lectina’ (do latim ‘legere’, que significa escolher, selecionar), representa um grupo heterogêneo de proteínas que variam amplamente em tamanho, estrutura, organização molecular, bem como na constituição de seus sítios de interação, desempenhando atividades biológicas diversas como antiinflamatórias, antifúngicas e antibióticas. As lectinas de plantas são as mais estudadas até então, embora algumas presentes em animais e microorganismos já tenham sido bem caracterizadas. O objetivo geral deste trabalho foi isolar, purificar e determinar atividades biológicas de uma nova lectina presente em sementes da leguminosa Canavalia maritima. Os resultados indicaram a presença de uma nova lectina com preferência em aglutinar eritrócitos nativos de coelho, purificada através de cromatografias de afinidade em sephadex G-50 e quitina, e de exclusão molecular em sistema HPLC, respectivamente. Por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida na presença de SDS, foi constatada a pureza e o peso molecular aproximado da nova lectina de 50 a 55 kDa. A nova lectina não promoveu hemólise em eritrócitos humanos dos tipos A, O e AB, em graus variáveis, o que reflete a sua especificidade de interação com diferentes açúcares. Com uma composição de 71,5 µg de carboidratos, a nova lectina demonstrou, pelo teste de inibição por açúcares, especificidade para os açúcares arabinose, frutose, maltose, sacarose e xilose. Por outro lado, a nova lectina, não inibiu o crescimento das linhagens bacterianas testadas, entretanto, observou-se que ela é capaz de promover a proliferação destes microorganismos. Apresentou atividade antiinflamatória, no modelo de peritonite induzido por carregenina em camundongos, reduzindo a migração dos neutrófilos no peritônio de camundongos e a permeabilidade dos vasos sanguíneos. Também produziu atividade antifúngica sobre o crescimento dos fungos C. neoformans, nos ensaios de crescimento das cepas, evidenciado pela determinação da CIM, onde os resultados demonstraram que não houve crescimento na presença da nova lectina. 

Canavalia brasiliensis pertence à família Leguminosae e sendo uma espécie do Novo Mundo e no Brasil pode ser encontrada nas regiões Norte, Nordeste, Centro-Oeste e Sudeste. Muitas espécies de plantas contêm proteínas de ligação a carboidratos as quais são comumente chamadas de lectinas ou aglutininas as quais são distribuídas em praticamente todos os organismos vivos. O referido trabalho objetivou detectar, purificar e caracterizar fisico-quimicamente uma lectina do extrato das sementes de C. brasiliensis e avaliar sua relação com bactérias patogênicas e processos inflamatórios. A lectina com afinidade por eritrócitos de coelho foi isolada através de cromatografia de afinidade em matriz de sephadex G-50 seguida de quitina; e exclusão molecular em sistema HPLC. O grau de pureza e o peso molecular da lectina foram determinados por eletroforese SDS-PAGE. A proteína foi caracterizada quanto à natureza glicoproteica, especificidade a açúcares e glicoproteínas, resistência ao pH, temperatura, agentes desnaturantes, redutores, oxidantes e quelantes. A lectina apresentou na SDS-PAGE duas bandas de 25 e 45 kDa  e um teor de 47 µg de carboidratos. Foi especifica para manose, frutose e maltose. Foi inativada quando aquecida a 90°C e 100°C durante 10 minutos e em pH 13,0. Teve sua atividade reduzida na presença de ureia 4 e 8 M e do metaperiodato de sódio; e aumentada com o β-mercaptoetanol; Não apresentou atividade frente às bactérias subtilis ATCC 0516, Escherichia coli ATCC 10536, Pseudomonas aeruginosa ATCC 8027, P. aeruginosa ATCC 25619, Staphilococcus aureus ATCC 6538 e S. aureus ATCC 25925, No modelo de peritonite induzido por carragenina, em camundongos, apresentou efeito antiinflamatório reduzindo a permeabilidade dos vasos sanguíneos e a migração dos neutrófilos no peritôneo de camundongos. Ela não foi tóxica para os animais.

Bactérias desempenham um papel fundamental na saúde dos corais. Devido à confirmação de que elas podem ser patogênicas ou mutualistas, aumentou o interesse no estudo de microrganismos associados aos corais. Nos recifes costeiros do Estado da Paraíba observam-se casos de alteração de pigmentação no escleractíneo Siderastrea stellata, que provavelmente ocorre no processo de branqueamento de corais. Neste trabalho objetivou-se analisar a quantidade e diversidade de bactérias cultiváveis associadas ao coral S. stellata sadio e com coloração alterada (roxo) dos recifes de corais de Cabo Branco, João Pessoa – PB, bem como os parâmetros físico-químicos e microbiológicos de água do mar da área estudada durante um ano. Entre as variáveis ambientais (temperatura, salinidade, pH, oxigênio dissolvido, turbidez) de água dos recifes e da praia de Cabo Branco apenas a turbidez apresentou maiores diferenças entre os locais estudados. Na base das análises de coliformes termotolerantes, Escherichia coli e enterococos foi constatado que a água dos locais analisados se enquadra dentro dos parâmetros para águas salinas de classe I (CONAMA 274/00).  Em geral, os valores da densidade de bactérias totais e Vibrio spp.  foram  significativamente maiores em água do mar nos meses de dezembro, janeiro e fevereiro. Na base de dados de sequenciamento parcial do gene rRNA 16S foi constatado que as bactérias isoladas de S. stellata sadia e roxa pertenceram ás classes de Alfa-proteobacteria e Gama-proteobacteria, sendo que a variedade dos gêneros de bactérias foi bastante distinta entre os isolados das duas colônias. Os isolados da colônia roxa apresentaram um alto percentual de Vibrio spp., que são bactérias geralmente relacionadas com as doenças de corais.

O câncer é uma doença com alta taxa de mortalidade no Brasil, dentre eles, o câncer de estômago constitui atualmente, o quarto tipo de câncer mais comum a nível mundial. No ano de 2012, estimam-se, para o Brasil, 12.670 casos novos de câncer do estômago em homens e 7.420 em mulheres. A sua etiologia é multifatorial, pois estudos sugerem associações a diversos fatores como: hábitos alimentares, fatores ambientais, fatores genéticos e epigenéticos e a infecção gástrica por Helicobacter pylori. Alterações epigenéticas tais como a metilação das regiões promotoras de genes envolvidos na homeostase celular podem contribuir  para carcinogênese gástrica. Para verificar o estado de metilação de genes THBS1, GPX3 e COX2 e avaliar a sua associação com a Helicobacter pylori (H. pylori) em adenocarcinomas gástricos, Methylation-Sensitive Restriction Enzyme PCR (MSRE-PCR) foi realizada em 39 carcinomas gástricos (intestinal e tipo difusa) e 15 amostras de tecido normal do estômago. A presença de H. pylori foi realizada por amplificação de um fragmento de rRNA 16S. Analysies estatísticas foram realizadas utilizando o teste exato de Fisher. A hipermetilação de GPX3, THBS1 e COX2 ocorreu em 18% (n = 7), 5% (n = 2) 36% (n = 14) das amostras de câncer gástrico, respectivamente, ao passo que em amostras normais foi encontrada em 13%, 7 % e 67%. A presença de H. pylorifoi detectada em 67% das amostras de câncer gástrico e 67% em amostras gástricas normais. Não foi encontrada correlação entre o perfil de metilação das amostras estudadas com variáveis clínico-patológicas e com presença de H. pylori (P > 0,05). A presença de H. pylori nas amostras de câncer gástrico e normais não foi associada com as variáveis clínico-patológicas analisadas (P > 0.05).

O presente trabalho teve o objetivo de avaliar a saúde das ostras ­Crassostrea gasar cultivadas no estuário do Rio Mamanguape (PB), com ênfase na infecção pelo protozoário Perkinsus sp.. O estudo foi conduzido sob duas abordagens: avaliação de respostas imunológicas em relação à infecção por Perkinsus sp. e histopatológica para detecção de parasitas, comensais e alterações patológicas. Ostras adultas foram coletadas em dezembro de 2011, março, maio, agosto e outubro de 2012 (N = 182). A detecção de Perkinsus sp. e sua intensidade foi determinada nas brânquias. Os hemogramas, a capacidade fagocítica, a produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) e a mortalidade hemocitárias na hemolinfa foram determinadas por citometria de fluxo e o título de aglutinação foi quantificado no plasma. Cortes histológicos foram preparados. Os resultados deste estudo evidenciaram a maior prevalência de Perkinsus sp. (93,3%) já registrada em ostras no Brasil, porém com intensidade moderada (1,9 ± 0,07; Media±EP). O aumento da infecção com este parasita afetou as respostas de defesa, diminuindo a capacidade fagocítica e a produção de ROS dos hemócitos além de ter aumentando a mortalidade celular, a proporção de células tipo-Blast e a quantidade de hemócitos circulantes. A análise histopatológica revelou a fagocitose como principal mecanismo de defesa desencadeado contra Perkinsus sp. nos tecidos (esôfago, estômago e intestino), mas sua proliferação foi observada nos casos de intensidade avançada. Outros organismos comensais e parasitas e uma neoplasia disseminada ocorreram com baixas prevalências e intensidades. Apesar das infecções parasitárias e da neoplasia disseminada, a saúde das ostras é considerada satisfatória nesta região.

A metilação do DNA é mediada por DNA metiltransferases (DNMT) que adicionam grupo metil no 5'-carbono da citosina regulando a expressão do gene epigeneticamente. O Metil é obtido como substrato S-adenosil-L-metionina (SAM) fornecida pela enzima metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR). O polimorfismo MTHFR na sequência de nucleotídos C / T na posição 677 produz um produto de proteico, com diminuição da atividade enzimática em influenciar o estado de metilação de DNA. Este estudo analisou o impacto do polimorfismo MTHFR C677T na metilação do DNA genômico global em células bucais. O DNA genômico de células epiteliais orais de 54 indivíduos saudáveis ​​foram purificados, genotipados e submetidos à análise de metilação global de DNA com um kit comercial baseado em ELISA. Nossos resultados indicam não haver diferenças no estado de metilação global do DNA percentual entre os grupos CC, CT e TT genotipados para o polimorfismo C677T do gene methylenotetrahidrofolate redutase (p = 0,75, Kruskal-Wallis). No entanto, os indivíduos com genótipo TT (homozigotos afetados) mostrou uma tendência à diminuição da metilação global de percentual em comparação com os  grupos homozigotos normais (CC) e (CT) heterozigotos.

O exame de DNA se realiza através da análise de sequências muito variáveis do genoma, chamadas de marcadores genéticos. Os marcadores presentes no cromossomo Y representam marcadores de linhagem, pois são transmitidos do pai para os filhos homens, sem mudanças. O conhecimento desse padrão genético permite o estudo de casos de investigação de paternidade, na identificação de estupradores e na identificação humana através da vinculação genética, entre indivíduos masculinos, pertencentes à mesma linhagem patrilínea. Para a adequada aplicação desses marcadores em uma população, porém, devem ser realizados estudos de frequências alélicas para se conhecer o grau de polimorfismo destes na população. Neste estudo, 17 marcadores STRs (DYS456, DYS389I, DYS390, DYS389II, DYS458, DYS19, DYS385a, DYS385b, DYS393, DYS391, DYS439, DYS635, DYS392, Y_GATA_H4, DYS437, DYS438 e DYS448) da região não recombinante do cromossomo Y foram analisados em 300 indivíduos não aparentados da Paraíba, estado do nordeste brasileiro. Um total de 276 diferentes haplótipos foi identificado, 254 dos quais eram únicos, 20 foram observados duas vezes e 2 foram observados três vezes na população investigada. A diversidade haplotípica encontrada foi de 0,9994, enquanto o poder de discriminação individual foi de 0,9134. A origem principal dessa população nordestina brasileira é do povo de Portugal, ao invés dos angolanos e dos nativos americanos. Estes resultados fornecem informação útil para prática forense na Paraíba, Brasil. 

Lectinas são proteínas e/ou glicoproteínas de origem não imune que possuem, no mínimo, um sítio não-catalítico que se liga de forma reversível a carboidratos e glicoconjugados, o que as tornam modelos ideais de estudos de interações célula-célula, célula-vírus, sendo bons modelos para o desenho de novos fármacos. O grupo de lectinas mais bem estudadas estruturalmente é o presente em sementes de leguminosas. A Fabaceae Acacia farnesiana possui em suas sementes uma aglutinina ligante de quitina (AFAL), classificada como PHA-like¹. Seu padrão cromatográfico revelou oligomerização tempo e pH-dependente. Esse comportamento dinâmico dificulta a cristalização dessa proteína, bem como determinação da estrutura tridimensional. Visando compreender melhor a relação estrutura-função, este trabalho teve por objetivo analisar a atividade anti-inflamatória de AFAL através de comparação estrutural com lectinas de leguminosas. Para tanto, fez-se a modelagem e docking molecular com um glicano e a carragenina. A AFAL apresentou um modelo dobrado como um sanduiche de folhas β, que difere do molde utilizado (lectina de Psium sativum) em regiões de loops, no número de folhas β e no sítio de ligação à carboidratos. O docking revelou que a proteína se liga à carragenina e ao glicano em sítios diferentes, o que pode ser explicado pela ausência de uma sexta folha β frontal e de duas folhas β na região posterior. A proteína de A. farnesiana pode inibir a inflamação causada por carragenina, por se ligar a ela, impedindo sua entrada na célula e o desencadeamento de reações típicas do processo inflamatório.

O mecanismo de resistência aos antimicrobianos é um fenômeno genético relacionado à existência de genes contidos no microrganismo que codificam diferentes proteínas, responsáveis por mecanismos bioquímicos que impedem a ação das drogas. A crescente incidência de bactérias resistentes tem minado o valor terapêutico dos antibacterianos existentes, criando a necessidade, cada vez maior, da busca por alternativas capazes de reverter ou diminuir a resistência, como a procura por inibidores de mecanismos de resistência. Bombas de efluxo, que são proteínas transmembrana envolvidas no transporte de substratos tóxicos, tem sido responsabilizada por diversos casos de resistência bacteriana a antibióticos, sendo associada à resistência a múltiplas drogas. “Modificadores da resistência à drogas”, “Modificadores da atividade antibiótica” e “Adjuvantes de antibióticos” são termos utilizados para drogas que modulam a resistência bacteriana a certos antibióticos, os quais podem agir inibindo o sistema de efluxo. No presente trabalho,  foram avaliados: extratos de Dictyota pulchella e Sargassum polyceratium, bem como os respectivos compostos isolados diterpeno e feofitina como possíveis inibidores da bomba de efluxo; extratos de: Gracilaria cervicornis, Sargassum polyceratiu,; Caulerpa mexicana, Caulerpa kempfii, Chondrophycus papillosus, Dictyota pulchella e Sargassum polyceratium com atividade antibacteriana mediada por Luz UV-A. As linhagens bacterianas utilizadas expressam o gene norA, msrA ou tetK codificadores das proteínas de efluxo para alguns compostos, como: norfloxacina (NorA), eritromicina (MsrA) e tetraciclina (TetK), respectivamente. Foram determinadas por meio da técnica de microdiluição em caldo nutriente os valores das concentrações inibitória mínima (CIM) dos antibióticos, extratos e constituintes de algas, e para avaliar a atividade moduladora, as CIM dos antibióticos  foram determinadas na ausência e na presença de concentrações subinibitórias dos produtos naturais. Nenhum dos extratos ou constituintes ensaiados mostrou atividade antibacteriana relevante (CIM ≥ 256μg/mL), no entanto, dois dos extratos, Dictyota e Sargassum e seus respectivos constituintes diterpeno e feofitina, apresentaram atividade moduladora nas linhagens ensaiadas. Eles reduziram os valores entre 2 e 16 vezes. Os extratos de Dictyota e Sargassum também apresentaram atividade antibacteriana mediana por luz. Os resultados aqui apresentados relatam pela primeira vez a esses extratos e constituintes testados agindo como um putativo inibidor do sistema de efluxo em bactérias, e também com atividade fototóxica. Logo, produtos naturais da flora algológica podem servir como fonte de produtos que modulam a resistência bacteriana, ou seja, como potenciais adjuvantes de antibióticos.

O Brasil é o país com maior índice de acidentes ofídicos registrados. As serpentes peçonhentas que ocorrem no país pertencem às famílias Viperidae e Elapidae. Acidentes ofídicos causam a liberação de substâncias farmacologicamente ativas com efeitos locais e sistêmicos como hemorragia, edema, necrose tecidual, miotoxicidade, cardiotoxicidade, neurotoxicidade e citotoxicidade, além de efeitos sistêmicos como coagulação sanguínea, sangramentos espontâneos, insuficiência renal e respiratória. Venenos de serpentes são fontes ricas em proteínas, peptídeos, compostos orgânicos e inorgânicos. As fosfolipases A2 (PLA2s) são as proteínas mais abundantes nas peçonhas dos diferentes gêneros de serpentes e apresentam efeitos tóxicos e farmacológicos de grande interesse médico-científico. O presente estudo tem por objetivos caracterizar físico-quimicamente epitopos B-lineares de três PLA2s isoladas da peçonha de Bothrops jararacussu reconhecidos por soros antiofídicos; analisar comparativamente, in silico, os epitopos B-lineares reconhecidos pelo soro que estão presentes e/ou ausentes em demais PLA2s isoladas de peçonhas de serpentes; relatar moléculas isoladas de extratos vegetais que possibilitem inibir os efeitos tóxicos e farmacológicos das PLA2s. Experimentos de síntese paralela de peptídeos realizadas em membranas de celulose possibilitaram identificar, por quimioluminescência, doze regiões das PLA2s (BthTX-I, BthTX-II e BthA-I) presentes na peçonha de Bothrops jararacussu reconhecidas por soros antiofídicos (antibotrópico e/ou anticrotálico). Análises comparativas entre PLA2s possibilitaram identificar que algumas regiões reconhecidas pelos soros antiofídicos são responsáveis por atividades neurotóxica, miotóxica e anticoagulante desencadeadas pelo ofidismo, propor inibidores alvos como protótipos para o planejamento e desenvolvimento racional de novas drogas fármaco-específicas para o tratamento de doenças negligenciadas e/ou soros antiofídicos menos agressivos e mais específicos ou, ainda, produtos biotecnológicos como quites diagnósticos para determinar o gênero da serpente envolvido em acidentes não identificados. Portanto, o presente trabalho elucida interação molecular soro-proteína e abre caminho para o desenvolvimento de produtos farmacêuticos, tratamento hábil e diagnóstico de ofidismos, podendo gerar fármacos seletivos e quites diagnósticos para os diversos gêneros de serpentes peçonhentas.

Cristais da lectina de sementes de Canavalia maritima (ConM) nativa foram obtidos pelo método da difusão de vapor em gota suspensa com solução do reservatório contendo tampão Hepes 0,1M pH 8.43 com 4% v/v de polietilenoglicol 400 e 2M de sulfato de amônio. Através de “soaking” dos cristais com açucares-fosfato foram produzidos cristais da lectina complexados ao açucar frutose 6-fosfato. Os cristais banhados com frutose 6-fosfato obtidos difrataram a uma resolução máxima de 1,84 Å, pertencendo ao grupo primitivo ortorrômbico, P2₁2₁2₁ com parâmetros de célula de a=59,15, b=80,82 e c= 99,65 Å e apresentando um monômero na unidade assimétrica (V_M = 2,39 A³ Da^-1). A estrutura tridimensional da lectina complexada a frutose 6-fosfato foi resolvida por técnicas de substituição molecular. ConM complexada a frutose 6-fosfato exibiu um alto grau de conservação do enovelamento terciário típico das lectinas de leguminosas. Analisando as densidades eletrônicas verificou-se que a molécula frutose-6-fosfato ligou-se a proteína no sítio de ligação a carboidratos, realizando pontes de hidrogênio com os resíduos de Tyr12, Asn14, Leu99, Tyr100, Asp208 e Arg228. Diferentemente do relatado em trabalhos anteriores, onde existiam quatro moléculas de água, interagindo com os íons Ca²⁺ e Mn²⁺ do sítio de ligação a carboidratos, nossos resultados evidenciaram que a interação com a frutose 6-fosfato teve consequência no número de pontes de hidrogênio formadas e no deslocamento de uma das duas moléculas de água de coordenação da ligação da lectina ao íon Mn²⁺. 

As subunidades ligadoras de substrato são componentes muito importantes do sistema de importação de soluto conhecido como sistema de osmoproteção que consiste em uma proteína de membrana pertencente à superfamlía ABC. Estas moléculas reconhecem substratos específicos que apresentam papéis fisiológicos diversos em procariotos, incluindo a colaboração para a sobrevivência destes organismos em ambientes com elevada concentração de sal. Utilizando o software MEGA, foi realizada uma análise filogenética de 431 sequencias nucleotídicas destas subunidades, ortólogas entre si, coletadas a partir do banco de dados contido no site http://www.genome.jp/kegg/. Como resultado desta análise foram geradas árvores filogenéticas que demonstraram claramente que houve a transferência horizontal de alguns dos genes devido ao compartilhamento por organismos diferentes. Foram geradas também duas prováveis sequências ancestrais que apresentam homologia com permeases que transportam colina, glicina betaína e carnitina, que são aminas trimetiladas, presentes atualmente em diversos procariotos. Portanto, este sistema provavelmente surgiu em organismos procarióticos com a função básica de captura de nutrientes e por desempenhar esta função basal ao ser compartilhado com outros organismos foi fixado aos genomas, no entanto a partir da diversificação de habitats, por parte dos procariotos, este sistema colaborou de forma decisiva para a adaptação destes organismos aos mais diversos ambientes, incluindo, especialmente os ambientes que apresentavam uma elevada concentração de sal, atuando e sendo caracterizado atualmente como um sistema de osmoproteção.

As leishmanioses são um complexo de doenças infecto-parasitárias endêmicas em 88 países que substituem um grave problema de saúde pública. Diversas espécies do gênero Leishmania são os agentes causadores da doença, dentre elas a espécie L. brazieliensis associada a diferentes quadros clínicos da Leishmaniose Tegumentar Americana. No presente trabalho foram obtidos nove isolados de Leishmania sp. oriundos de LTA, sendo sete isolados (87%) oriundos de pacientes residentes no município de Pilões, um (13%) da cidade de João Pessoa, ambos os municípios do estado da Paraíba. Todos os nove isolados foram identificados como sendo da espécie L. braziliensis através de PCR específica. As análises de caracterização molecular pela técnica de RAPD-PCR mostraram que esses isolados compartilharam 62,63% revelando diferenças genotípicas entre elas. Contudo, os isolados AF e JSL, ambos provenientes de lesões disseminadas, tiveram o maior percentual de bandas compartilhadas dentre os isolados. Outra técnica molecular utilizada foi o SSR-PCR com o iniciador K7 que também foi capaz de demonstrar polimorfismo entre os isolados. Nas análises de PCR-RLFP das regiões ITS1, foram encontradas perfis diferentes entre os isolados, onde MRSS, JMTS, AF, JCTS, JRL apresentaram o mesmo perfil de bandas e os isolados JSL, JCNS, MFTS e JAS tiveram, cada um, perfis de bandas distintos. Na análise de PCR-RLFP da região do gene hsp70, JSL, AF, JCTS, JRL, MFTS apresentaram o mesmo perfil de bandas e os isolados , MRSS, JMTS, JCNS, e JAS perfis de bandas distintos. Adicionalmente foram também observadas diferenças fenotípicas entre estes isolados, visto que em cada momento de cultivo, todos apresentaram comportamento diferenciado, além de demonstrarem diferenças quanto à sensibilidade às drogas utilizadas na terapêutica das leishmanioses. Portanto, estes estudos revelam que os isolados de L. braziliensis obtidos no estado da Paraíba demosntraram um significativo polimorfismo genético, revelando um alto nível de variação instraespecífica.

A Fertilização é uma sequência ordenada de interações celulares que promove a fusão entre os gametas para formar um novo indivíduo. Os transportadores ABC são expressos nas membranas plasmáticas de células eucarióticas e procarióticas, e no sistema de endomembranas de células eucarióticas, sendo associados ao transporte de vários compostos ou íons através das biomembranas. Estudos conduzidos em espermatozóides de ouriço-do-mar relataram o envolvimento de uma proteína da superfamília de proteínas ABC na reação acrossômica. O objetivo do presente trabalho foi investigar o envolvimento dos transportadores ABCB1 e ABCC1 na capacidade de fertilização dos espermatozóides de ouriço-do-mar Echinometra lucunter. A capacidade de fertilização foi avaliada por meio da análise da elevação do envelope de fertilização sob microscopia óptica comum e a atividade funcional dos transportadores ABC através do ensaio de acúmulo intracelular da calceína. Nossos dados demonstraram que a ativação dos espermatozóides com a secreção gonadal feminina aumentou o acúmulo intracelular de calceína. Uma vez que o MK571, um bloqueador do transportador ABCC1, aumentou o acúmulo intracelular de calceína em espermatozóides não expostos à secreção gonadal feminina, sugerimos uma regulação negativa sobre a atividade dos transportadores ABCC1 durante a ativação espermática. Adicionalmente, verificamos que tanto a reversina 205 (bloqueador do transportador ABCB1) quanto o MK571, reduziram o percentual de óvulos fertilizados pelos espermatozoides ativados. Além disso, nossos dados demonstraram que a redução da capacidade de fertilização dos espermatozoides tratados com os bloqueadores dos transportadores ABCB1 e ABCC1 (7,5 + 2,2% fertilização e 25,3 + 4,1% fertilização, respectivamente, contra 93,6 + 2.2% fertilização no grupo controle) é dependente de fatores termo-estáveis presentes na secreção gonadal feminina. Nossos resultados sugerem que a atividade funcional dos transportadores ABCB1 e ABCC1 é fundamental para o sucesso da fertilização por espermatozóides ativados. Estudos adicionais devem ser realizados para investigar o envolvimento dos transportadores ABC na homeostase dos lipídios de membrana no processo de fertilização.

O Salicilato de Borneol (SB) é um derivado salicílico, obtido pela esterificação do ácido salicílico e do monoterpeno(-)-borneol, e seu uso tópico em doenças inflamatórias foi descrito no início do século XX. Sabe-se que o borneol possui atividade neuroprotetora, genoprotetora e analgésica. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade do SB em modelos experimentais de inflamação aguda. A toxicidade do SB foi analisada, mensurando-se o consumode água e ração, peso, letalidade e peso dos principais órgãos. Para avaliar seu efeito anti-inflamatório, camundongos pré-tratados com SBforam submetidos aos protocolos de edema de pata induzido por carragenina, prostaglandina E2, bradicinina ou histamina, peritonite induzida por zimosan e aumento da permeabilidade vascular induzido por ácido acético. A produção de NO foi analisada em cultura de macrófagos peritoneais. Não foram observados sinais de toxicidade aguda com a administração de SB em camundongos machos e fêmeas. Além disto, o pré-tratamento com SB foi significativamente (p<0,05) eficaz na redução do edema de pata induzido por carragenina em tempos precoces e tardios, pela modulação de eicosanoides e bradicinina, e independente de histamina. A migração de neutrófilos e a liberação de citocinas (TNF-a, IL-1 e IL-6) provocadas pelo zimosan, bem como o extravasamento de fluidos mediado pelo ácido acético também foram reduzidos em animais tratados com SB. In vitro, o SB reduziu a liberação de NO em células estimuladas por LPS. Estes dados sugerem que SB tem efeitos anti-inflamatórios relacionados com diferentes mecanismos da inflamação, e novos estudos são necessários para explorar seu potencial.

A ouabaína é um potente esteroide cardiotônico identificado como uma substância endógena do plasma humano, sendo produzida pelo hipotálamo, hipófise e glândula adrenal e inibidora da Na⁺/K⁺ ATPase. Atualmente, sabe-se que essa substância é capaz de interferir em vários aspectos da imunidade, inclusive em processos inflamatórios. Pouco se conhece sobre o efeito da ouabaína na resposta imune causada pela Leishmania. O objetivo deste trabalho foi compreender a atividade imunomoduladora da ouabaína na Leishmania amazonensis em camundongos Swiss. Para tanto utilizamos as seguintes metodologias: edema de pata, análise da carga parasitária, migração de células para cavidade peritoneal, análise das citocinas por ELISA, ensaio de citotoxicidade, porcentagem de macrófagos infectados e determinação dos níveis de cálcio intracelular.  A ouabaína foi capaz de reduzir o tamanho da lesão no edema de pata produzido pela Leishmania amazonensis na segunda e terceira semana após infecção. Assim como induzir o aumento da carga parasitária (32%) no linfonodo poplíteo. A ouabaína também reduziu a migração de células da cavidade peritoneal (45% e 57%) nos tempos de 24 e 48 horas respectivamente, porém no sétimo dia não houve mudanças. Este resultado deve-se a redução do número de neutrófilos para o local da inflamação nos tempos de 24 e 48 horas (29% e 22%). Com relação às citocinas presentes no lavado peritoneal a ouabaína foi capaz de diminuir a produção de IFN-γ (95%) no tempo de 24 horas e TNF-α (90%) no sétimo dia após infecção. Adicionalmente, foi verificado que a ouabaína não possui ação citotóxica para os macrófagos em estudo nos ensaios de MTT e azul de Trypan, mas foi capaz de aumentar a porcentagem de macrófagos infectados (42%) assim como os níveis de Ca²⁺ intracelular, sendo efeito mais pronunciado na concentração de 100 nM (37%). Sendo assim, demonstramos que a ouabaína foi capaz de interferir nos eventos iniciais da resposta imune desencadeada pela Leishmania amazonensis. Esses dados corroboram o efeito anti-inflamatório da ouabaína descrito na literatura. No entanto, são necessários estudos adicionais para compreender os mecanismos envolvidos, uma vez que não há na literatura informações sobre modelos de infecção in vivo com Leishmania na presença da ouabaína. Sugerimos um possível efeito imunomodulador da ouabaína em modelos de infecção in vivo.

As lipases e os biossurfactantes produzidos por microrganismos estão envolvidos no metabolismo de substratos oleosos e despertam grande interesse biotecnológico. Neste trabalho foi analisada a produção de lipases e biossurfactantes por bactérias isoladas de um solo utilizado para descarte do óleo vegetal residual. Das 66 linhagens isoladas, todas demonstraram atividade lipolítica quando incubadas no meio ágar tributirina. No meio contendo ágar rodamina B, com azeite de oliva ou óleo de soja, o número de linhagens lipolíticas variou de 21 a 25, dependendo do substrato e do pH do meio. Atividade lipolítica das 25 linhagens positivas no ágar rodamina B com azeite de oliva, avaliada pelo método titulométrico, variou de 0,62 U/mL/min a 12,4 U/mL/min. A linhagem mais ativa na produção de lipases, identificada através do seqüenciamento do gene 16S rRNA como espécie pertencente ao complexo Burkholderia cepacia, foi submetida à análise da Metodologia de Superfície de Resposta, para determinar as condições ótimas de pH e temperatura.  A linhagem Burkholderia sp. O19 apresentou alta atividade lipolítica em ampla faixa de pH e temperatura, sendo que a maior atividade foi prevista para pH e temperatura superiores a 8,5 e 65^oC, respectivamente. Todas as linhagens bacterianas demonstraram produzir biossurfactantes em pelo menos um dos três métodos analisados. O teste de dispersão do óleo diesel permitiu a detecção de biossurfactantes em todas as linhagens, enquanto a emulsificação e atividade hemolítica foram observadas em 73% e 59% das linhagens, respectivamente.

As lipases e os biossurfactantes produzidos por microrganismos estão envolvidos no metabolismo de substratos oleosos e despertam grande interesse biotecnológico. Neste trabalho foi analisada a produção de lipases e biossurfactantes por bactérias isoladas de um solo utilizado para descarte do óleo vegetal residual. Das 66 linhagens isoladas, todas demonstraram atividade lipolítica quando incubadas no meio ágar tributirina. No meio contendo ágar rodamina B, com azeite de oliva ou óleo de soja, o número de linhagens lipolíticas variou de 21 a 25, dependendo do substrato e do pH do meio. Atividade lipolítica das 25 linhagens positivas no ágar rodamina B com azeite de oliva, avaliada pelo método titulométrico, variou de 0,62 U/mL/min a 12,4 U/mL/min. A linhagem mais ativa na produção de lipases, identificada através do seqüenciamento do gene 16S rRNA como espécie pertencente ao complexo Burkholderia cepacia, foi submetida à análise da Metodologia de Superfície de Resposta, para determinar as condições ótimas de pH e temperatura.  A linhagem Burkholderia sp. O19 apresentou alta atividade lipolítica em ampla faixa de pH e temperatura, sendo que a maior atividade foi prevista para pH e temperatura superiores a 8,5 e 65^oC, respectivamente. Todas as linhagens bacterianas demonstraram produzir biossurfactantes em pelo menos um dos três métodos analisados. O teste de dispersão do óleo diesel permitiu a detecção de biossurfactantes em todas as linhagens, enquanto a emulsificação e atividade hemolítica foram observadas em 73% e 59% das linhagens, respectivamente.